Cuando realizamos el diagnóstico clínico de los animales, la histopatología es una de las pruebas complementarias más importantes. Esta implica la evaluación microscópica de lesiones que observamos. Para esto, debemos tomar muestras de los tejidos u órganos lesionados. Pero no siempre se tienen en cuenta las medidas adecuadas para este muestreo. Así que, hoy queremos repasar buenas prácticas al momento del envío de muestras al laboratorio de histopatología.

¿Qué necesitamos?

Frascos, preferentemente de plástico (para evitar roturas y lesiones), con boca ancha y cierre hermético.

• Formol al 10%.
• Elementos de protección: mameluco, guantes de látex, gafas protectoras.
• Cuchillo afilado y/o bisturí.
• Pinzas.

¿Cómo hacemos el formol 10%?

El formaldehído comercial es un fijador químico que viene a una concentración de 40%. Utilizando ese insumo como «formol puro», realizamos una mezcla de 9 partes de agua (preferentemente destilada o desmineralizada) y 1 parte de formol. Por ejemplo, vamos a utilizar 900 ml de agua y 100 ml de formol comercial para hacer 1 litro de solución al 10%. Vale aclarar que el «formol al 10» va a presentar una concentración de formaldehído del 4%, que es algo que suele causar confusión ya que en algunos lados al hablar del formol al 10% se lo llama formol 4% (en realidad eso es formaldehído al 4%). También se puede utilizar formol bufferado, en las mismas proporciones. Existen otros fijadores, pero son más específicos y el formol es el más común.

¿Cómo tomamos la muestra?

Como esta muestra no es para bacteriología, lo más importante no es la esterilidad, sino la calidad de la muestra en cuanto al tejido. Se recomienda que tamaño de 1 cm de cada lado, y que presente tanto una zona visiblemente lesionada como una zona visiblemente sana. En caso que se envíe porciones más grandes, se deben realizar cortes para que el fijador (formol al 10) pueda penetrar en el tejido. Si las lesiones son multifocales, se recomienda enviar muestras de distintas partes del órgano.

En caso que las muestras sean tomadas en necropsia, lo ideal es que se muestreen animales recién muertos o animales enfermos y sacrificados para tal fin. Se recomienda también que se envíen muestras de la mayor cantidad de órganos posibles, para no perder datos que macroscópicamente no hayas sido percibidos.

La muestra se coloca en frascos con el formol al 10%. Aquí lo importante es respetar la proporción tejido:formol de 1:10, es decir que el formol debería representar 10 veces el tamaño de la muestra. Para los tejidos que flotan, como pulmón o lipomas, se recomienda envolverlos con gasa y asegurarse de que queden cubiertos por formol.

¿Rotulamos?

No hay que olvidarse de rotular los frascos. Es preferible enviar hoja adjunta, ya que el formol puede borrar las tintas indelebles.

En caso de tener, se puede poner las muestras dentro de casetes histológicos, pudiendo rotular con lápiz cada muestra por separado y pudiendo colocar varias en un frasco, siempre respetando la relación 1:10 con el formol.

Es importante que la muestre esté bien identificada porque hay tejidos u órganos en los cuales según cómo se dispongan en el taco de parafina es cómo se verán sus cortes histológicos.

¿Enviamos?

El envío debe realizarse en algún tipo de contenedor, debidamente identificado, que evite cualquier tipo de filtración en caso de derrame de líquidos.

Si bien la muestra puede permanecer en formol indefinidamente, buscamos un diagnótico rápido, por lo cual debemos llevar la muestra al laboratorio en cuanto se pueda. Cabe aclarar que mínimamente el fijador (formol al 10) debe actuar por 24 hs sobre el tejido para lograr una buena fijación del mismo, y el procesamiento suele llevar un par de días más, por lo cual no hay dejar ganar a la impaciencia y esperar por el diagnóstico el tiempo que el veterinario de laboratorio indique.

¿Y los datos?

Siempre remitir las planillas con datos del veterinario, el establecimiento y los animales en sí.

• Identificación del Médico Veterinario: nombre, dirección de consulta o clínica, teléfono y correo electrónico.
• Identificación del propietario: particular, empresa, industria.
• Identificación del paciente: nombre, especie, edad, sexo, raza.
• Anamnesis: Antecedentes clínicos, pre diagnóstico, cirugía realizada, órgano o tejido enviado.
• Fecha de la solicitud.

¿Qué vamos a solicitar?

Es importante tener en claro qué vamos a solicitarle al laboratorio. De rutina, se realiza la coloración de hematoxilina-eosina que permite observar la histoarquitectura de los tejidos y las lesiones histopatológicas que presenta. Pero existen otras tinciones que pueden ser de ayuda al momento de determinar el diagnóstico.

Entrada originalmente publicada el 10 de marzo de 2019 en: Cómo preparar muestras para laboratorio de histopatología — La Vaca Atada